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<正> 目的:研究RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)在抗乙型肝炎病毒中的作用。方法:针对乙型肝炎病毒表面抗原基因的序列设计2条小片段发夹状DNA,分别插入到带U6启动子的PAVU6+27载体中,建成表达目的shRNA(short hair RNA)的质粒载体;同时构建含乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和绿荧光蛋白的融合表达载体,pGFP-S。将2种载体共转染HepG2细胞株,转染后24,48,72h荧光显微镜观察,同时流式细胞术检测融合基因荧光表达情况;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HBsAg mRNA表达水平;放射免疫法检测HBsAg抗原活性。结果:转染表达shRNA的载体,48-72h抑制了pGFP-S的荧光表达,流式细胞仪检测,抑制率为34%;RT-PCR结果显示HBsAg mRNA的表达受到显著抑制;放射免疫学检测显示HB-