论文部分内容阅读
目的观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂西乐葆对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响。研究其对COX-2表达的影响,探讨西乐葆诱导MG-63凋亡的作用机制,以及西乐葆与顺铂联合作用的效果。方法西乐葆作用MG-63细胞48h后,MTT法测定西乐葆对入骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率,电子显微镜、流式细胞仪和DNA ladder检测细胞凋亡,RT-PCR法检测MG-63细胞COX-2 mRNA表达变化,西乐葆与顺铂联合Western blot检测PI3K/Akt、survivin、bcl-2、Caspase-8,9,3蛋白表达变化。利用特异性的PI3K抑制剂wortmannin(1μmol/L)作用于MG-63细胞48h,观察PI3K/Akt、survivin、bcl-2的表达变化。结果西乐葆对MG-63细胞生长具有抑制作用,呈现时间与剂量依赖性;诱导细胞凋亡;西乐葆与顺铂联合具有协同作用;西乐葆没有降低COX-2蛋白表达,降低了PI3K/Akt、survivin、bcl-2的表达,激活了Caspase-9,3,并没有Caspase-8的激活。特异性的PI3K抑制剂wortmannin(1μmol/L)作用于MG-63细胞48h,检测到pAkt(Thr308),bcl-2,survivin表达的下调。结论西乐葆可通过非COX-2途径诱导MG-63的凋亡,可能与PI3K/Akt、survivin、bcl-2相关,激活了内源性的细胞凋亡途径。PI3K/Akt途径在survivin、bcl-2表达调控中发挥重要作用,可能是Celecoxib药物干预的中心环节。