ATG5依赖性自噬在NVP-BEZ235调控腺样囊性癌细胞顺铂敏感性中发挥作用

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研究目的:通过观察NVP-BEZ235与顺铂(CDDP)联合用药时唾液腺腺样囊性癌SACC细胞的自噬情况,探讨NVP-BEZ235诱导的细胞自噬对ACC细胞顺铂敏感性的影响,并通过siRNA干扰SACC细胞ATG5基因表达,探讨ATG5在NVP-BEZ235调控唾液腺ACC细胞化疗敏感性中的作用。研究方法:比较NVP-BEZ235组,CDDP组及NVP-BEZ235+CDDP组,NVP-BEZ235+CDDP+CQ组SACC细胞抑制率、自噬及凋亡情况。siRNA干扰ATG5表达后,检测NVP-BEZ235与CDDP联合处理下细胞抑制率、凋亡及自噬。研究结果:(1)NVP-BEZ235浓度范围5nM-50nM时,降低了顺铂对SACC-83细胞的杀伤作用。(2)单独使用CDDP时,ACC细胞自噬瞬时增强后减弱,单独使用NVP-BEZ235细胞自噬增强,NVPBEZ235与CDDP联合处理时,细胞自噬增强。(3)单独使用CDDP时,ACC细胞凋亡增强,单独使用NVP-BEZ235时细胞凋亡减弱,NVP-BEZ235与CDDP联合处理时,细胞凋亡较单独使用CDDP时减弱。(4)以CQ预处理SACC-83细胞抑制自噬后,NVP-BEZ235+CDDP联合处理,与未以CQ预处理组比较,CQ预处理组细胞死亡率高于未CQ预处理组,细胞自噬流被抑制,凋亡增强。(5)siRNA干扰ATG5表达,NVP-BEZ235与CDDP联合处理,细胞抑制率干扰组高于NC组,自噬水平干扰组低于NC组,凋亡水平干扰组高于NC组。研究结论:NVP-BEZ235抑制唾液腺ACC细胞m TOR活化水平,诱导自噬,对细胞CDDP化疗起保护作用,降低细胞凋亡。下调ATG5表达,增加了CDDP与NVP-BEZ235联用时ACC细胞凋亡,逆转了NVP-BEZ235对ACC细胞顺铂杀伤的保护作用。NVP-BEZ235通过mTOR信号上调细胞内ATG5的表达,上调ACC细胞ATG5依赖性自噬,减少凋亡发生,从而保护唾液腺ACC细胞,降低顺铂对ACC细胞的杀伤作用。
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