【摘 要】
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目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(ASⅡ)逆转人肝癌细胞Bel-7402/FU耐药与MAPK信号转导通路的关系,为肝癌临床化疗方案的制定及耐药逆转研究提供理论基础。方法采用Western-blot检测ASⅡ作
【机 构】
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安徽医科大学药学院安徽天然药物活性研究省级实验室安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心国家中医药管理局中医药科研三级实验室"中药药理实验室"; 安徽医科大学第一附属医院药剂科;
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目的探讨黄芪皂苷Ⅱ(ASⅡ)逆转人肝癌细胞Bel-7402/FU耐药与MAPK信号转导通路的关系,为肝癌临床化疗方案的制定及耐药逆转研究提供理论基础。方法采用Western-blot检测ASⅡ作用于耐药细胞Bel-7402/FU后p糖蛋白(PgP)的表达和ERK,JNK,P38的磷酸化情况。ERK/MAPK的抑制剂PD98059,JNK/MAPK的抑制剂SP600125,P38/MAPK的抑制剂SB202190分别作用于Bel-7402/FU后,RT-PCR和免疫组化分别检测mdrl基因和p-gp蛋白的表达情况,流式细胞仪检测RH123在细胞内蓄积和贮留情况。阻断剂处理后再加入5-氟尿嘧啶(5-FU),MTT法进一步检测Bel-7402/FU增值抑制情况。结果经ASⅡ作用后,P-gp蛋白的表达明显减少,ERK,JNK,P38的磷酸化程度明显降低。用MAPK通路阻断剂阻断通路后,mdrl的mRNA表达明显下调,P-gp蛋白的表达也明显减少,同时RH123在细胞内的蓄积和贮留明显增加。结论 ASⅡ能够减少人肝癌耐药细胞Bel-7402/FU中p-gP蛋白的表达,同时降低ERK,JNK,P38的磷酸化程度;阻断MAPK通路的活化能抑制mdrl基因和P-gp蛋白的表达以及P-gp的功能,且使Bel-7402/FU细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性增加。
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