内毒素对奶牛子宫内膜细胞的毒性初探

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【目的】为探究奶牛子宫内膜炎发病过程中细菌内毒素的致病机理。【方法】运用细胞学技术分离纯化了原代中国荷斯坦奶牛子宫内膜上皮细胞(Endometrial Epithelial Cell,EnEpC),并进行体外培养。经免疫组化鉴定培养的子宫内膜上皮细胞纯度较高、性质稳定。利用体外细胞毒理学的方法,以不同浓度的细菌内毒素(LPS)作用细胞,在一定作用时间后,以噻唑蓝(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-diphenytetrazoliumromide,MTT)法法和磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)法检测了LPS对细胞活力和细胞增殖的影响。【结果】MTT试验结果显示,10ng/mj~6.25μg/ml的LPS对EnEpC的活力促进率具有剂量依赖效应,最高达到56.36%,6.25~25μg/ml的LPS对EnEpC的活力促进率在(54.94+1.30)%;50μg/ml的LPS开始对细胞活力产生显著的抑制作用,抑制率为5.12%,至250μg/ml时抑制率达到36.60%,根据线性同归方程计算出LPS对EnEpC的活力抑制率达到50%时的作用剂量为350μg/ml。SRB试验结果显示,0.781μg/ml、1.562μg/ml、3.125μg/ml的LPS对EnEpC的增值促进率依次增大为8.55%、10.88%和14.85%;6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml的LPS对EnEpC的增值促进率依次降低为1 1.39%、9.87%和5.39%。50μg/ml的LPS开始对细胞增殖产生显著的抑制作用,抑制率为20.09%,至250μg/ml时增殖抑制率达到48.89%,根据线性回归方程计算出LPS对EnEpC的增殖抑制率达到50%时的作用剂量为250μg/ml。【结论】低剂量的内毒素(≤6.25μg/ml)对奶牛子宫内膜上皮细胞具有显著的促增殖作用,而高剂量的内毒素(≥50μg/ml)对奶牛子宫内膜上皮细胞具有显著的增殖抑制作用。
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