【目的】检测断奶仔猪腹泻大肠杆菌中超光谱β3-内酰胺酶基因（ESBL）的流行特征。【方法】从2012年4月至2013年8月,从黑龙江不同地区采集断奶仔猪腹泻样本,分离鉴定大肠杆菌;用双纸片协同法确定产ESBL的菌株;微量肉汤稀释法测定ESBL阳性大肠杆菌的耐药性;PCR方法检测ESBL阳性大肠杆菌中bla_TEM、bla_SHV、bla_CTX-M基因的流行情况;DNA测序确定ESBL基因的亚型。【结果】从2012年4月至2013年8月共分离断奶仔猪腹泻大肠杆菌458株,用双纸片协同法确定198株为ESBL阳性株:ESBL阳性大肠杆菌对氨苄西林、头孢噻呋、头孢噻肟、阿米卡星、庆大霉素、四环素、氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸、恩诺沙星、环丙沙星、复方新诺明的耐药率分别为96.7%、43.7%、41.9%、32.8%、72.5%、93.9%、84.7%、83.2%、97.4%、82.8%、77.5%和95.6%;PCR结果显示,198株ESBL阳性大肠杆菌中,191株大肠杆菌携带bla_CTX-M-1-组、bla_CTX-M-9-组基因,70株只携带bla_CTX-M-1-组,1 15株只携带bla_CTX-M-9-组组基因,6株菌同时携带bla_CTX-M-1-组和bla_CTX-M-9-组基因;149株ESBL阳性菌检测到bla_TEM基因,bla_SHV基因没有检测;DNA测序结果显示,bla_CTX-M-1-组基因共有blac_CTX-M-3、bla_CTX-M-15、bla_CTX-M-55、blacTx-M-64和bla_CTX-M-123五种亚型,以bla_CTX-M-15、bla_CTX-M-55为主要亚型,blacTx-M-Ρ-组基因共有bla_CTX-M-14、bla_CTX-M-27、bla_CTX-M-65、bla_CTX-M-104和bla_CTX-M-125五种亚型,且以bla_CTX-M-14和bla_CTX-M-65为主要亚型,bla_TEM基因都是bla_TEM-1亚型-【结论】产ESBL酶在断奶仔猪腹泻大肠杆菌中广泛存在,且基因型以bla_CTX-M基因为主。