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背景:根据功能和诱导条件,可以将巨噬细胞大致划分为M1型和M2型,在肿瘤组织局部浸润的巨噬细胞(即肿瘤相关巨噬细胞)具M2型巨噬细胞的特征,参与免疫抑制微环境的形成,有促进肿瘤生长的作用。研究表明,通过靶向肿瘤相关巨噬细胞将其从M2型极化为M1型有助于抑制肿瘤生长。课题组前期研究表明,枸杞多糖活性片段LBP3可以改善小鼠肿瘤免疫微环境,其机制可能与促进肿瘤相关巨噬细胞向M1型极化有关。目的:考察枸杞多糖活性片段LBP3是否能将巨噬细胞从M2型逆转为M1型。方法:参考文献方法,RAW264.7细胞加入IL-4(20ng/ml)诱导为M2型,然后加入不同剂量的的LBP3刺激24h。收集细胞上清,采用ELISA检测细胞因子TNF-α、IL-6和TGF-β1含量;采用Griess试剂盒检测NO含量。收集细胞,利用流式细胞术检测细胞表型CD206、MHC II类分子表达水平;采用WB检测细胞中NF-κB(P65)蛋白表达水平。结果:RAW264.7细胞经IL-4诱导转变为M2型,表现为TGF-β1分泌水平显著增加,CD206分子表达水平明显升高,受LPS刺激后NO分泌水平显著降低。结果显示LBP3可以明显促进M2型巨噬细胞分泌NO和细胞因子TNF-α、IL-6,下调TGF-β1分泌水平,提高MHC II类分子表达水平,抑制CD206分子的表达,同时提高细胞NF-κB(P65)蛋白表达水平。结论:枸杞多糖活性片段LBP3可以将巨噬细胞从M2型逆转为M1型,这可能是其改善荷瘤小鼠肿瘤免疫微环境的关键机制。