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CCT伴侣蛋白是一类相对保守的寡聚化蛋白复合体,广泛存在于原核和真核生物中,与蛋白质的合成及正确折叠过程密切相关。有报道称柔嫩艾美耳球虫CCT1 (EtCCT1)可以定位在球虫表膜,可能与虫体的耐药和生长发育相关,但未见EtCCT2的报道。本实验室前期研究发现柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫CCT2 (EmCCT2)功能存在差异。因此,本研究拟对EtCCT2的功能进行研究,并分析其与EmCCT2的功能差异。成功克隆了鸡球虫的CCT2基因(EtCCT2:ETH 00011965;EmCCT2:EMWEY00009780),并制备了鼠源多克隆抗体。间接免疫荧光实验表明该蛋白定位于虫体胞膜、胞质和子孢子顶端,提示该蛋白可能与虫体入侵和发育相关。抗体阻断实验结果显示CCT2抗体对子孢子入侵宿主细胞的抑制作用不明显。根据其它物种CCT2功能的报道,推测该蛋白可能与宿主细胞成分存在相互作用。随后我们对EtCCT2与细胞互作蛋白进行分析,结果发现EtCCT2与宿主CCT4(HcCCT4)互作。共定位和免疫共沉淀实验验证了EtCCT2与HcCCT4的互作关系。为了进一步研究互作对细胞的影响,我们检测互作复合物的定位情况。结果发现,EtCCT2-HcCCT4以颗粒状聚集的形式存在;随着时间的延长互作复合物入核,最终导致核裂解。流式结果显示外源表达EtCCT2导致细胞凋亡率上调。因此,我们推测EtCCT2与HcCCT4互作可能诱发细胞凋亡的发生。我们对EmCCT2进行了同样的分析,但没检测到类似的现象。这可能是柔嫩和巨型艾美耳球虫定殖环境不同而导致的功能差异。