EV71感染患儿外周血T细胞、B细胞表达水平研究

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目的分析EV71感染手足口病患儿外周血T细胞亚群的比例及其相应的特征性转录因子表达;了解EV71感染患儿外周血B细胞及B10细胞表达水平。方法研究对象为2014年11月至2015年7月广州市妇女儿童医疗中心收治的EV71急性感染期患儿32例,对照组为32例健康体检儿童。采用流式细胞术检测病例组和对照组总T细胞(CD3+)、辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)、调节性T细胞(Treg)、B细胞(CD19+)以及B10细胞(IL-10+CD19+)的比例。采用流式细胞术检测Th1细胞(IFN-γ+CD3+CD8-)、Th2细胞(IL-4+CD3+CD8-)、Th17细胞(IL-17+CD3+CD8-)、Tfh细胞(IL-21+CD3+CD8-)在Th细胞中的比率;Tc1细胞(IFN-γ+CD3+CD8+)、Tc2细胞(IL-4+CD3+CD8+)、Tc17(IL-17+CD3+CD8+)、产生IL-21的CD8+细胞(IL-21+CD3+CD8+)在Tc细胞中的比率。应用RT-QPCR分别检测Th1、Th2、Th17、Treg、Tfh细胞的转录因子T-bet、Gata3、RORγt、Foxp3、TCF-1、BCL6的表达水平。结果与对照组相比,病例组CD3+T细胞、Th、Tc细胞明显下降(P <0.01)。病例组Th1、Tc1、Treg(CD25hiCD127low)与对照组相比明显降低(P <0.01)。病例组Th2、Tc2、Th17、Tc17、Tfh、IL-21+CD3+CD8+细胞、B细胞及B10细胞与对照组相比明显升高(P<0.01);Th1/Th2及Tc1/Tc2比值降低,而Th17/Treg比值则明显升高;病例组转录因子Foxp3、T-bet、Gata3的MRNA表达与对照组相比明显降低(P <0.05);而转录因子RORγt、TCF-1、BCL6的mRNA表达量与对照组未见统计学差异。结论 EV71急性感染期,患儿外周血细胞免疫功能降低,各细胞亚群间比例失衡,机体免疫应答向Th2及Th17偏移;B淋巴细胞存在高表达,可能参与疾病的发展过程。
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