三七皂苷R1对小鼠肠缺血再灌注后肝脏微循环障碍的改善作用

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目的:三七皂苷 R1(Notoginsenoside R1,R1)是五加科植物三七的主要有效成分之一,含有 R1的中药制剂在中国用于肝脏微循环障碍相关疾病的治疗。但是,关于 R1对肝脏微循环障碍影响的研究尚未见报道,本研究探讨 R1对小鼠肠系膜上动脉缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)引起的肝脏微循环障碍的改善作用及其机理。方法:取体重为22—26g 的 C57/BL 小鼠(雄雌各半),用乌拉坦麻醉后,将肝脏展开于有透明窗的观察板上,置于有恒温装置的倒置生物显微镜上,表面连续滴加37℃的生理盐水。10分基础观察后,用直径为1mm 的聚乙烯管结扎鼠小肠系膜上动脉15分,然后解除结扎,建立缺血再灌注模型(I/R)。用连接于 CCD 摄影机和高速摄像机具有恒温装置的倒置生物显微镜分别观察和记录小鼠肝脏小叶间静脉和中心静脉的血管径、红细胞流速、肝窦开放数。用激光共聚焦显微镜观察系统计数游走和黏附的白细胞数。在再灌注30分钟和60分钟后,分别取外周血,测定了血清乳酸脱氢酶(LDH),丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST)的浓度。用流式细胞仪检测再灌注30分钟后外周血粒细胞黏附分子 CD11b 和 CD18的表达及血清炎性因子 TNF-α、IL-6、MCP-1的浓度。用免疫荧光法染肝脏血管内皮的 ICAM-I 和 E-selectin 阳性染色部位。假手术组小鼠在小鼠肠系膜上动脉外做一个松结。RI+I/R 组小鼠在结扎前10分钟开始经颈静脉连续滴入 R1(10mg/kg/h)。结果:肠系膜上动脉缺血再灌注后,小鼠肝脏中心静脉和小叶问静脉血管径缩小,血流速度降低,肝窦开放数量减少,白细胞游走和黏附数增加,肝脏血管内皮的 E-selectin 表达增加,外周血粒细胞黏附分子 CD18 的表达增加,IL-6、MCP-I、ALT、AST 和 LDH 浓度增高。R1可以显著抑制肠系膜上动脉 I/R 引起的上述改变, 但是,对外周血 IL-6和 MCP-1的升高没有抑制作用。结论:三七皂苷 R1可以改善肠系膜上动脉缺血再灌注引起的小鼠肝脏微循环障碍和肝细胞损伤,该作用与其抑制粒细胞粘附分子 CD18和肝脏血管内皮细胞选择素 E-selectin 的表达相关。
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