【摘 要】
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目的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of swine,MPS)的主要病原,其致病机理为特异性的黏附于猪的呼吸道黏膜上皮组织,造成
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心; 山西农业大学动物科技学院;
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目的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of swine,MPS)的主要病原,其致病机理为特异性的黏附于猪的呼吸道黏膜上皮组织,造成上皮细胞的病变或坏死,引发MPS的发生。本研究利用猪肺炎支原体强弱毒株建立体外感染猪呼吸道上皮细胞差异模型,为分析猪肺炎支原体感染与宿主细胞的应答提供试验模型。材料与方法猪肺炎支原体168株(强毒株)和168L株(弱毒株)由江苏省农业科学院兽医研究所保存。猪肺泡上皮细胞(SJPI)由华中农业大学肖少波教授惠赠。以猪肺炎支原体168株(强毒株)和168L株(弱毒株)体外感染猪肺泡上皮细胞,通过对感染细胞进行NO检测,筛选感染时间和感染剂量,然后利用H2O2测定、间接免疫荧光(IFA)检测和DAPI染色验证细胞的氧化损伤程度及差异分析。结果与讨论结果显示,在感染时间为36h,感染剂量为5×106CCU时,强毒株感染细胞的NO浓度显著高于弱毒株(P<0.05),同时强弱毒都极显著高于对照组(P<0.01);H2O2检测显示强弱毒株感染细胞后H2O2浓度显著高于对照(P<0.01),而且强弱毒株之间产生的H2O2浓度也存在显著性的差异(P<0.05);IFA拍照可见强毒株在细胞上的黏附量高于弱毒株;DAPI染色表明强毒株对细胞造成的损伤程度也高于弱毒株。结论建立了猪肺炎支原体强弱毒株感染猪肺上皮细胞引起损伤差异模型,为深入探讨猪肺炎支原体致病机理以及以此为基础的早期诊断、疫苗和药物研究提供参考。
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