【摘 要】
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目的:H2O2在表皮内的聚集促进了白癜风皮损中黑素细胞(melanocyte,MC)的损伤。通过抗氧化剂清除H2O2对白癜风患者有治疗作用。银杏叶作为一种传统中药应用于白癜风的治疗,其所
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目的:H2O2在表皮内的聚集促进了白癜风皮损中黑素细胞(melanocyte,MC)的损伤。通过抗氧化剂清除H2O2对白癜风患者有治疗作用。银杏叶作为一种传统中药应用于白癜风的治疗,其所含的萜类内酯主要成份白果内酯,具有很强的抗氧化作用。本研究,我们通过H2O2与人MC共培养建立MC的氧化损伤模型,并研究白果内酯对氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:原代培养的人MC用白果内酯预处理24小时后,与1mM的H2O2共培养16小时。四唑盐{(MTS)}细胞增殖试剂盒与乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒试剂盒检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,观察白果内酯对人MC的保护作用。ELISA试剂盒检测MC分泌的热休克蛋白70(HSP70)水平;用流式细胞仪检测活性氧水平,定量RT-PCR检测过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶1(peroxidase 1,GPX1)mRNA的表达水平,West ern blot检测CHOP和磷酸化elF2A表达,研究其保护机制。结果:呈剂量依赖性,白果内酯预处理显著抑制了H2O2诱导的MC凋亡、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生和HSP70的分泌,并促进MC内CAT和GPX1的mRNA表达。白果内酯轻度提高磷酸化eIF2A表达说明其有激活未折叠蛋白信号通路作用,并能阻断H2O2诱导的CHOP表达。结论:这一研究首次说明白果内酯能抑制H2O2诱导的正常人MC的氧化损伤及凋亡;通过减少HSP70的释放,抑制对MC的自体免疫损伤。并非直接清除ROS,白果内酯通过提高抗氧化酶包括CAT及GPX1的表达及抑制内质网应激信号保护MC。
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