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调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)在免疫调节方面具有重要作用,可限制免疫反应和保持免疫耐受平衡。根据细胞来源,这群细胞可分为胸腺Treg细胞(nTreg),外周Treg细胞(pTreg)和体外诱导Treg(iTreg),虽然都表达Foxp3,但是三者的功能和稳定性存在显著差异。既往研究发现nTreg可通过表达颗粒酶A、B和穿孔素诱导细胞毒作用杀伤B细胞,然而iTreg对B细胞,尤其是自身反应性B细胞的作用未被阐明。目的:研究iTreg对B细胞活化、增殖和抗体产生的作用以及机制的探索,为iTreg应用于自身免疫性疾病的治疗提供证据。方法:取C57BL/6小鼠脾脏,分离得到na(i|¨)ve CD4~+T细胞,IL-2和TGF-β条件下体外培养iTreg细胞,对照细胞为胸腺来源nTreg细胞。1)建立iTreg和B细胞共培养系统,体外研究iTreg对B细胞活化、增殖和抗体的产生的抑制作用。2)应用体内研究系统,观察iTreg对B细胞活化和增殖的影响。3)应用Transwell和TGF-β受体抑制剂,观察iTreg细胞对B细胞的抑制作用是否依赖于细胞接触和分泌的细胞因子。4)观察NZM2328狼疮小鼠,输注iTreg细胞前后,dsDNA抗体和蛋白尿水平变化;同时应用microarrays分析法检测多种自身抗体水平变化,反映iTreg对B细胞体内产生抗体的影响。结果:1)体外研究发现iTreg和nTreg都可抑制B细胞活化、增殖和抗体的产生。2)体内研究发现iTreg可抑制B细胞活化和增殖。3)iTreg可通过直接接触抑制B细胞,并主要依赖于TGF-β受体信号系统。4)输注iTreg细胞,可显著减少NZM2328狼疮小鼠dsDNA抗体和蛋白尿水平;同时应用microarrays分析发现多种自身抗体水平下降,并优于nTreg细胞。结论:iTreg可有效抑制B细胞活化、增殖和抗体的产生,并能改善狼疮症状,下调多种自身抗体,提示iTreg细胞可治疗B细胞介导的自身免疫性疾病,为临床应用提供了前期数据。