【摘 要】
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异胡豆苷合成酶在萜类吲哚生物碱(TIA)合成通路中起着限速酶的作用。本研究用RACE方法克隆了铁皮石斛异胡豆苷合成酶基因DoSTR (GenBank:KX068707),并进行生物信息学分析、组
【机 构】
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淮北师范大学生命科学学院; 安徽农业大学生命科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31501368,81573518);安徽省自然科学基金资助项目(1408085MC58);安徽省高校自然科学基金资助项目(KJ2015ZD35,KJ2018A0403,KJ2018B15,KJ2016A644,KJ2017A846,KJ2014B21)
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异胡豆苷合成酶在萜类吲哚生物碱(TIA)合成通路中起着限速酶的作用。本研究用RACE方法克隆了铁皮石斛异胡豆苷合成酶基因DoSTR (GenBank:KX068707),并进行生物信息学分析、组织表达模式分析及亚细胞定位试验。研究结果表明:DoSTR全长1380bp,开放编码框为1179bp,编码392个氨基酸。荧光定量PCR显示Do STR在所有的组织中均表达,属于组成型表达基因,并且在铁皮石斛花中表达量最高,在茎中表达量最低。用茉莉酸甲酯(Me JA)、水杨酸(SA)、脱落酸(ABA)和硝酸银(AgNO3)等四种物质分别处理铁皮石斛原球茎,发现四种物质均能诱导DoSTR的表达,其中MeJA对DoSTR的诱导效率最高,48h诱导达到峰值,是对照组的20.7倍。通过在烟草细胞中瞬时表达DoSTR,发现该蛋白主要定位于液泡中。对DoSTR的克隆和分析有助于进一步了解其在铁皮石斛生物碱合成过程中的作用和功能。
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