目的探讨制备同时携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗的双靶向超声微泡造影剂的可行性,并在体外评价其靶向能力。方法采用"生物素-亲和素"桥接法分别构建携抗ICAM-1单抗与抗CD34单抗的双靶向超声微泡(MB-D)、携抗ICAM-1单抗超声微泡(MB-I)、抗CD34单抗体超声微泡(MB-C)及普通的生物素化微泡(MB),观察其形态、粒径、表面电位等物理特性,共聚焦显微镜观察抗体与微泡的连接情况,流式细胞术检测抗体的结合率。制备人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤模型,提取和培养大鼠的内皮祖细胞,光镜下观察该双靶向超声微泡与损伤HUVEC及内皮祖细胞的结合情况,以普通超声微泡为对照组。用DFY型超声图像定量分析诊断仪评价上述造影剂的声学特性。结果双靶向超声微泡的粒径,电位及分布与单抗体超声微泡及普通微泡相似。共聚焦显微镜下观察到超声微泡表面均可激发出绿色和红色荧光。流式细胞术结果显示MB-D、MB-I、MB-C的携带率均在80%以上。体外寻靶实验显示,光镜下该靶向组超声微泡在损伤HUVEC及内皮祖细胞周围牢固结合,而对照组未见特异性结合。DFY型超声图像定量分析诊断仪分析出上述4组造影剂的声学特性有差异。结论成功制备了携抗ICAM-1抗体和抗CD34抗体的双靶向超声微泡造影剂,并具有较强的靶向结合能力。