【摘 要】
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目的研究蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株抑制增殖和诱导凋亡作用。方法应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株增殖抑制作用;通过倒置显微镜、HE染色、吖啶橙
【机 构】
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延边大学基础医学院病理学与法医学教研部;
【基金项目】
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吉林省中医药管理局中医药科技项目基金资助(NO:08sy5102);延边大学研究生科研基金资助项目NO:延大研科合字(2008)第15号
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目的研究蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株抑制增殖和诱导凋亡作用。方法应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株增殖抑制作用;通过倒置显微镜、HE染色、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)染色及扫描电镜等方法观察肿瘤细胞的形态学改变;采用流式细胞仪检测Hela细胞株的细胞周期分布相和细胞凋亡率;通过免疫细胞化学S-P法测定细胞凋亡相关蛋白酶Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3,凋亡相关基因及产物bcl-2和Fas蛋白,增殖细胞核抗原Ki-67,细胞周期蛋白CyclinD1,候选抑癌基因Syk及核转录因子NF-κB的表达情况。结果MTT结果显示蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株有明显的抑制增殖作用,呈现明显的浓度和时间的依赖性;倒置显微镜、HE染色、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)染色及扫描电镜下观察可见典型的凋亡形态学改变;流式细胞仪检测结果显示:蝙蝠葛活性成分可以诱导Hela细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰,并且G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.01),而S期和G2/M期细胞比例则明显下降(P<0.01),将细胞阻滞在G0/G1期;免疫细胞化学结果表明:蝙蝠葛活性成分作用后加药组Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Fas、Syk、和NF-κ3表达增加,bcl-2、Ki-67和Cyclin D1蛋白表达降低,与对照组相比较均有显著差异(P<0.01)。结论蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株具有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,有望开发成一种新的抗肿瘤药物。
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