【摘 要】
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目的很多研究表明胶质瘤细胞中JNK异常激活,而JNK受上游激酶精准调控,MKK7及MKK4属于JNK上游激酶且在胶质瘤细胞中高表达,本研究旨在1.明确胶质瘤细胞中是MKK7还是MKK4调控JNK-c-Jun活性;2.研究HDAC家族中哪些成员在调控MKK7或MKK4的表达;3.研究HDAC调控MKK7或MKK4的具体机制是什么;4.探讨干预HDAC或JNK-c-Jun活性是否影响胶质瘤迁移、侵袭方
【出 处】
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第十三届中国医师协会神经外科医师年会
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目的很多研究表明胶质瘤细胞中JNK异常激活,而JNK受上游激酶精准调控,MKK7及MKK4属于JNK上游激酶且在胶质瘤细胞中高表达,本研究旨在1.明确胶质瘤细胞中是MKK7还是MKK4调控JNK-c-Jun活性;2.研究HDAC家族中哪些成员在调控MKK7或MKK4的表达;3.研究HDAC调控MKK7或MKK4的具体机制是什么;4.探讨干预HDAC或JNK-c-Jun活性是否影响胶质瘤迁移、侵袭方法 1.胶质瘤细胞中利用小分子干扰沉默MKK7或MKK4,检测p-JNK/JNK,以及p-cJun/c-Jun的表达和转录;2.用组蛋白去乙酰化酶抑制剂（TSA、SAHA、M344、VPA等）处理胶质瘤细胞,检测MKK7、p-JNK/JNK及p-c-Jun/c-Jun的表达以及MKK7的转录;3.小分子干扰和过表达HDAC处理胶质瘤细胞,检测MKK7及p-JNK/JNK,p-c-Jun/cJun的表达及MKK7的转录;4.双荧光素酶报道基因技术寻找MKK7转录起始位点,Ch IP技术明确HDAC是否结合于MKK7的启动子核心序列;5.Transwell实验检测各种处理对胶质瘤细胞迁移、侵袭能力的影响;6.免疫组化检测HDAC及MKK7在人脑胶质瘤样本中的表达及其相关性结果 1.小分子干扰MKK7,JNK-c-Jun的活性下降,小分子干扰MKK4无变化;2.过表达HDAC4后MKK7的转录增强,干扰其则增强,过表达SP1,MKK7表达下降,干扰SP1则增强;3.HDAC6介导MKK7的稳定性;4.报道基因实验和Ch IP实验证明SP1调控MKK7的启动子活性;5.胶质瘤病人样本中MKK7高表达且与JNK和c-Jun正相关;6.Transwell实验结果表明抑制HDAC4、HDAC6及MKK7可抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭结论 1.在胶质瘤细胞中是MKK7而不是MKK4调控JNK-c-Jun活性;2.HDAC4在胶质瘤细胞中转录调控MKK7的表达;3.转录因子SP1介导了抑制HDAC4情况下MKK7的负调控;4.HDAC6介导了MKK7的稳定性;5.沉默MKK7抑制胶质细胞迁移、侵袭;抑制HDAC4/HDAC6,抑制胶质细胞迁移、侵袭;6.高级别人脑胶质瘤组织中HDAC4/HDAC6与MKK7表达呈正相关性。
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