基于PMA-PCR-DGGE对检测生鲜南美白对虾在贮藏过程中微生物多样性方法的优化

来源 :中国食品科学技术学会第十二届年会暨第八届中美食品业高层论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingdingdeaiqing85
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  叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)是一种对核酸具有高度亲和力的光敏反应染料,能够选择性地进入具有不完整细胞膜的细菌死细胞中,交联死菌DNA,将其与DNA扩增检测技术相结合,可有效地抑制死菌细胞DNA的扩增.本实验旨在研究PMA对生鲜南美白对虾在不同温度贮藏过程中微生物多样性变化的影响以及活菌的多样性分析.样品在4 ℃、25℃贮藏条件下,分别在第1、2、3、5天以及第4、8、1 2、1 6小时取样,每个样品均匀分成两部分,分别用PMA处理和不用PMA处理,随后进行PCR-DGGE分析.结果表明,在4℃贮藏条件下,样品中微生物多样性明显受到PMA影响,通过对DGGE条带割胶回收、克隆测序表明Vibrio cholerae、Exiguobacterium acetylicum、Aeromonas enteropelogenes、Eubacterium multif orme、Vibrio mimicus五种菌受PMA影响最为明显.然而在25℃贮藏条件下,微生物多样性几乎不受PMA影响.Vibrio parahaemolyticus、Lactococcus lactis在两个温度下均不受影响,为优势菌种. PMA与PCR-DGGE相结合,可以精确地分析冷冻冷藏食品中活的微生物多样性,有利于产品货架期预测、风险评估等.
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