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[目的]苯并吡唑类广谱杀虫剂氟虫腈（Fipronil,FPN）可损伤肝脏、肾脏及甲状腺,对机体产生较强的毒害作用。本研究的目的是根据氟虫腈的结构特点设计合成半抗原,制备高灵敏度的氟虫腈及其代谢物的单克隆抗体,为鸡蛋及其他食品中氟虫腈及其代谢物的免疫学检测方法的建立奠定基础。[方法]选择氟虫腈作为靶标物质,以脱三氟甲亚硫酰基氟虫腈为原料,使用己二酸酐化学合成法合成氟虫腈半抗原（FPN2）,通过活泼酯法将其与钥孔血蓝蛋白（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）以及卵清白蛋白（OVA）偶联得到免疫原（FPN2-EDC-KLH、FPN2-EDC-BSA）和包被原（FPN2-EDC-OVA）。通过免疫小鼠,血清检测,细胞融合,克隆筛选等制备氟虫腈及其代谢物的单克隆抗体。[结果]半抗原经液相色谱-质谱（HPLC-MS）鉴定合成成功,完全抗原经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定,测得与BSA偶联率为18.13:1,完全抗原合成成功。制备获得4株单克隆抗体mAb19F8、3G8、6B8、7F11,经间接竞争ELISA鉴定,对氟虫腈的半数抑制浓度(IC50)分别为2.490 ng/mL、2.936 ng/mL、5.642 ng/mL、4.191 ng/mL,其中mAb19F8对其结构类似物氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈硫醚交叉反应率分别为31.23%、21.24%、88.83%。[结论]本研究成功制备了高灵敏度的氟虫腈单克隆抗体,该抗体可识别氟虫腈及其代谢物,为检测鸡蛋以及其他食品中氟虫腈及其代谢物的免疫学分析方法的建立奠定了基础。