硒化修饰提高当归多糖免疫增强活性的研究

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(目的)比较硒化当归多糖(sCAP)和未修饰的当归多糖(CAP)对鸡外周血淋巴细胞增殖及新城疫苗免疫效果的影响,探讨硒化修饰提高当归多糖免疫增强活性的可能性。(方法)提取、纯化当归多糖,用硝酸-亚硒酸钠法修饰,以亚硒酸钠用量、反应温度和反应时间三因素、三水平正交设计9种修饰条件,得到9个硒化当归多糖sCAP1~sCAP9;体外试验,将安全浓度范围内9个sCAPs与CAP分别加入到鸡外周血淋巴细胞的培养体系中,用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化;体内试验,选择体外试验显示活性较强的sCAP2、sCAP6、sCAP83个修饰多糖为比较对象,取14日龄雏鸡180只随机均分为6组,除空白对照组外用新城疫疫苗免疫,28日龄二免。在首次免疫的同时,4个多糖组分别每羽皮下注射1 mg.mL-1的3个修饰多糖和未修饰的CAP 0.5 mL,免疫对照组和空白对照组注射等量生理盐水,每天1次,连续3 d。分别于首免后第7、14、21、28 d采血,测定淋巴细胞增殖和血清ND抗体效价。(结果)体外试验结果显示,各多糖在一定的浓度均能显著促进淋巴细胞增殖,sCAP2、sCAP6.和sCAP8的作用较强;在体内试验结果显示,3个修饰多糖在大多数时间点能显著促进淋巴细胞增殖,sCAP2和sCAP6在多数时间点的作用显著强于未修饰的CAP,sCAP2的作用最强;3个修饰多糖组在大多数时间点的抗体效价显著高于免疫对照组,在一些时间点显著高于未修饰的CAP组。(结论)以上结果表明,硒化修饰能显著提高CAP的免疫增强活性,sCAP2.的作用最强,可以作为免疫增强剂的组分药。
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