补阳还五汤协同同种肌源性干细胞改善急脊髓损伤模型的实验研究

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目的探讨补阳还五汤与同种肌源性干细胞联合注射治疗急性脊髓损伤的效果,为临床干细胞与中医综合治疗脊髓损伤提供实验学基础与理论依据。方法利用SD大鼠的乳鼠提取肌源性干细胞(MDSCs),传代培养,雄性SD大鼠制作Allen’s打击脊髓损伤(SCI)模型,实验分为5组,对照组:脊髓损伤后不进行任何处理。假手术组:仅行椎板切除术,不损伤脊髓。干细胞注射组:脊髓损伤后行同时,脊髓损伤后开始于损伤部位注射MDSCs,每天一次。中药组:脊髓损伤后灌服补阳还五汤,每天一次。联合组:脊髓损伤后联合注射MDCSs并灌服补阳还五汤,每天一次。在脊髓损伤后1d,3d,7d,15d,30d分别进行BBB评分以及斜板实验,同时在各时间点取材,通过免疫组化,免疫蛋白印迹以及RT-PCR技术检测神经系统发育过程中发挥重要作用的Notch信号通路关键节点基因Notch1,Detla1,Hes1的表达情况,探讨其协同作用可能达到的治疗效果,探讨其修复急性脊髓损伤的可能机制。结果与对照组相比,干细胞注射与补阳还五汤均能明显促进脊髓损伤后神经功能的恢复,两者在效果上并不存在明显差异,联合治疗组恢复情况明显优于干细胞注射组与补阳还五汤组,免疫组化,免疫蛋白印迹以及RT-PCR结果显示补阳还五汤组与干细胞组中脊髓组织中Notch信号通路关键节点基因Notch1,Detla1,Hes1被抑制,而在联合治疗组这种抑制作用更加明显,且损伤脊髓的功能恢复与Notch信号通路关键节点基因的基因抑制程度成正比。结论补阳还五汤与MDSCs均能明显促进SCI后各项功能的恢复,两者联合治疗能取得更加明显的疗效,这种联合作用于其更加明显抑制Notch信号通路有关。
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