目的:探讨核因子κB(NF-κB)在牙髓卟啉单胞菌(Pe)脂多糖(LPS)诱导小鼠成骨细胞株MC3T3-El Wnt5a表达中的作用。方法:以不同质量浓度的Pe-LPS(0~50mg/L)和以20mg/L Pe-LPS刺激MC3T3-E1细胞不同时间(0~24h)后,实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白印迹(WB)检测Wnt5a mRNA和蛋白的表达。20 mg/L Pe-LPS刺激MC3T3-El细胞后,免疫荧光(IF)、WB和萤光素酶报告基因(luciferase reporter assay)检测NF-κB核易位、p65磷酸化和NF-κB转录活性变化的情况。NF-κB特异性抑制剂BAY-117082预处理细胞后用IF检测其对于NF-κB核易位抑制的情况,qRT-PCR检测其对于Wnt5a基因表达的影响。染色质免疫沉淀(ChIP)的方法检测NF-κB与Wnt5a启动子结合情况。采用SPSS 13.0软件包对结果进行单因素方差分析和Dunnett t检验。结果:当以不同质量浓度Pe-LPS(0~50mg/L)刺激MC3T3-E1细胞和以20mg/L Pe-脂多糖作用细胞不同时间(0~24h)后,Wnt5a mRNA和蛋白的表达具有剂量和时间依赖性。在静息状态下,NF-κB定位在胞质中,20 mg/L Pe-LPS刺激MC3T3-E1细胞15 min后即引起NF-κB快速的核易位,120 min后大部分NF-κB重新定位在胞质里,WB和luciferase reporter结果也证实了NF-κB的活化。10μm/L BAY-117082预处理1 h可以有效抑制Pe-LPS引起的NF-κB核易位,降低Pe-LPS诱导MC3T3-El细胞Wnt5a mRNA表达的水平。ChIP结果显示20 mg/L Pe-LPS刺激MC3T3-El细胞90min后NF-κB与Wnt5a启动子结合。结论:Pe-LPS可能通过激活NF-κB信号途径诱导MC3T3-El细胞产生Wnt5a。