附子理中汤通过激活AMPK通路及抑制NF-KBp65通路降低非酒精性脂肪肝大鼠肝脏损伤

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目的:探究附子理中汤(Fuzilizhong decoction,FZLZD)对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty livet disesse,NAFLD)大鼠肝脏的保护作用及相关机制。方法:32只SPF级雄性Wistar大鼠被随机分为4组,对照组,模型组,易善复(Yishanfu,YSF)组(200 mg·kg-1·d-1)以及FZLZD组(10 g·kg-1·d-1),每组8只。采用脂肪乳持续4周灌胃制备大鼠非酒精性脂肪肝模型。确定造模成功后,给予各给药组大鼠持续给药4周。8周后处死各组大鼠,H&E染色检测大鼠肝组织病理学变化;采用全自动生化分析仪检测各组大鼠空腹血清中血脂含量(总胆固醇T-Chol;甘油三酯TG:低密度脂蛋白胆固醇LDL-C和高密度脂蛋白胆固醇HDL-C)以及肝功能(丙氨酸氨基转移酶ALT,总蛋白TP和白蛋白ALB);称重法计算各组大鼠肝指数;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测肝组织中炎症因子TNF-α、IL-6的分泌水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝组织中脂肪代谢相关因子SREBP-1c、FASN的mRNA水平;Western blotting检测肝组织中p-AMPK及p-NF-κBp65蛋白表达量。结果:H&E染色结果显示,与对照组比较,模型组大鼠肝组织出现明显的病理学变化:肝小叶轮廓不清,肝细胞呈弥漫性脂肪样空泡病变,并呈炎性浸润,胞核固缩、着色深:与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织病变均出现显著缓解,尤其以FZLZD组缓解程度最为显著。血清检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠血清中血脂(T-Chol、TG、LDL-C和HDL-C)、肝功能(ALT、TP和ALB)及肝指数均显著升高(均P<0.01):与模型组比较,各治疗组大鼠血脂及肝功能各指标均显著降低(均P<0.01),FZLZD组大鼠肝指数显著降低(P<0.05),而YSF组大鼠肝指数无显著变化。ELISA及qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠肝组织中炎症因子TNF-α、IL-6分泌水平及SREBP-1c、FASN的mRNA水平均显著升高(均P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织中炎症因子TNF-α、IL-6分泌水平及SREBP-1c、FASN的mRNA水平均显著降低(均P<0.01);与YSF组比较,FZLZD组TNF-α、IL-6分泌水平及SREBP-1c、FASN的mRNA水平差异显著(均P<0.01)。Western blotting结果显示,与模型组比较,FZLZD组大鼠肝组织中p-AMPK蛋白表达量显著升高(P<0.01),而p-NF-κBp65蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论:附子理中汤能显著改善NAFLD大鼠肝脏病理变化,降低血脂含量,改善肝功能,降低肝指数,这可能与其激活AMPK通路进而抑制SREBP-1c、FASN的表达以及抑制NF-κBp65通路进而降低炎症因子的释放密切相关。
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