目的 建立AP-PCR鉴定真菌的实验方法,建立已知标准菌种AP-PCR的DNA带型,并以此标准的DNA带型为依据,对20例取自皮损培养后的真菌进行AP-PCR及培养鉴定的双盲对照的初步研究。 材料及方法 已知标准菌种山我科真菌室提供,均经形态学、生理、生化反应鉴定。实验菌种共有14种,包括须癣毛癣菌,红色毛癣菌,断发毛癣菌,紫色毛癣菌,黄癣菌,同心毛癣菌,马毛癣菌,石膏样小孢子菌,羊毛状小孢子菌,絮状表皮癣菌,孢子丝菌,新生隐球菌,禾谷镰刀霉,高氏瓶霉等,一株金黄色葡萄球菌由我院细菌室提供,做对照。第一步用已知标准菌种建立稳定的实验方法;第二步用已知标准菌种进行AP-PCR,建立DNA带型标准;第三步以建立的标准DNA带型为依据,对20例取自临床皮损培养后的真菌进行AP-PCR及培养鉴定的双盲对照的初步研究。 结果 同一引物同一模板DNA在同一次实验的不同管和不同次实验中可扩增出一致的DNA带型。不同次提取的同一种不同株真菌DNA带型而不同种真菌的DNA用引物OPAA11区分能力强,表现在不同种真菌的DNA扩增后带数少且差异明显。对从临床皮损中分离培养的20株真菌进行的双盲对照研究,发现AP-PCR的鉴定结果与培养后的形态、生理、生化反应鉴定结果一。 结论 AP-PCR可用于真菌鉴定,且比较稳定可靠。但AP-PCR用于鉴定真菌需筛选区别能力高的引物,双盲对照研究的结果初步说明AP-PCR可用于临床标本的真菌鉴定,为进行临床标本的AP-PCR直接真菌鉴定打下基础。国内外这方面的研究都处于起始阶段,许多工作还需要做,但其潜在的应用前景非常诱人。