非甾体抗炎药双氯芬酸钠在欧盟已被批准用于猪和牛,欧盟规定(2009)双氯芬酸钠在牛和猪可食性组织中的双氯芬酸钠残留标识物为双氯芬酸,肌肉、脂肪、肝脏和肾脏中的残留限量(MRLs)分别5、1、5和10μg/kg;牛奶中的残留标识物亦为双氯芬酸,MRL为0.1μg/kg。【目的】本研究拟建立生鲜牛奶中双氯芬酸钠的残留检测方法。【方法】取试料10 g,加入托芬那酸(内标)混匀静置后,加入10 mL乙腈及1 g乙酸铵,高速涡旋1 min,4℃条件下4500 g离心20 min;取上清液7 ml转入10 mL带盖聚丙烯离心管中,50℃条件下氮气吹干,加入200μL0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸(50+50),涡旋振荡30 s,经孔径为0.22μm滤膜过滤后,进样;梯度洗脱,进行HPLC-ESI+-MS/MS,MRM模式,双氯芬酸钠的监测离子为296.0→250*,215,托芬那酸的监测离子为262.0→209*,244。取空白试料,加入双氯芬酸钠和托芬那酸标准溶液,按照前述方法提取、净化,并检测,绘制标准曲线,确定线性范围及相关系数等。【结果】检测限和定量限分别为0.03和0.05μg/kg,在0.05~5μg/kg的浓度范围内,线性关系良好,相关系数大于0.99;双氯芬酸钠的添加浓度分别为0.05、0.5和5μg/kg时,其加样回收率在84.6%~108.5%之间,批内变异系数小于10%,批间变异系数小于25%,符合农业部相关文件的要求。【结论】该方法稳定可靠,简便易行,满足牛奶中双氯芬酸钠残留(MRL为0.1μg/kg)的检测要求,可用于牛奶中双氯芬酸钠残留量的测定,以及双氯芬酸钠注射液给药后,牛奶中双氯芬酸钠的残留消除研究。