【摘 要】
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脱氧肌苷(deoxyinosine,简称dI)由次黄嘌呤和脱氧核糖构成,是嘌呤循环的重要环节.细胞内广泛存在着腺苷脱氨酶以及活性氮自由基,它们均能够使deoxyadenosine(dA)转化为dI
【机 构】
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中国科学院生态环境研究中心,北京100085
【出 处】
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第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会
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脱氧肌苷(deoxyinosine,简称dI)由次黄嘌呤和脱氧核糖构成,是嘌呤循环的重要环节.细胞内广泛存在着腺苷脱氨酶以及活性氮自由基,它们均能够使deoxyadenosine(dA)转化为dI[1,2].dI 与DNA 的稳定性、碱基错配密切相关[3].然而,DNA 提取过程中伴随脱氨酶的影响以及用来水解DNA 的酶可能夹杂腺苷脱氨酶(ADA),均会将dA 转化为dI.这些因素都会引起检测dI 在细胞中含量的失真.因此,发展一种可靠的DNA 提取和水解方法,以及准确、快速检测dI 含量的HPLC-MS/MS 方法是必要的.在前期工作中,我们证实了sigma 的PDE1、PDE2 具有ADA 活性;通过在酶解过程中添加不同浓度的EHNA,这些酶的ADA 活性受到显著抑制;建立了dI 的HPLC-MS/MS 分析方法.然而当前的方法仍有许多不足之处,需要进一步考查DNA 提取和酶解过程中的诸多因素(如温度、时间、ADA 抑制剂的种类和添加量等)对dI 测定的影响,以确定dI 的最佳分析方法.
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