老年大鼠脾切除术后认知功能的改变与海马组织腺苷酸活化蛋白激酶的表达

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目的探讨老年大鼠脾切除术后认知功能的改变与其海马组织腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine monophosphate activated kinase,AMPK)的表达。方法选择63只健康雄性老龄SD大鼠,体重480-550g。采用随机数字表法将大鼠随机分为3组:对照组(C组,n=21)、麻醉组(A组,n=21)、手术组(S组,n=21)。术前前五天进行Morris水迷宫训练,每天于同一时间段进行,第一至四天每天从东、南、西、北四个等距离点中选一点将动物面向池壁放入,其游泳图像经水面上方2m处摄像机拍摄并连接于路径追踪系统进行采集。训练前将老年大鼠先放于平台20s再面对池壁放入迷宫,每次游泳时限为90S,在90 s内未找到平台者系统自动停止记录,潜伏期记为90S,由测试者引导其上台,休息20S后进行下一次训练。在第五天每一点连续训练两次用平均成绩作为术前成绩。训练后手术组是腹腔注射10%水合氯醛0.3ml/100g麻醉后行腹部脾切除手术,在肋缘下腹中线偏左1cm消毒后切开1.5-2.0cm切口后游离脾脏结扎动静脉,切除脾脏后用0号线关腹。术后1d,3d,7d进行水迷宫测试后断头取海马组织;麻醉组是腹腔注射1 0%水合氯醛0.3ml/100g,麻醉后1d,3d,7d进行水迷宫测试后断头取海马组织;对照组只给予相同剂量的生理盐水,给予生理盐水后1d,3d,7d进行水迷宫测试后取大脑组织。术后或麻醉后1、3、7 d用与第五天相同的步骤进行行为学测试,记录成绩进行比较。均选用逃避潜伏期、游泳路径作为衡量大鼠学习和记忆测试成绩的指标。采用weston-blot法测定AMPK、P-A MPK海马区的表达,图像用Quantity one图像分析软件(Bio Rad公司,美国)分析比较AMPK、p-AMPK的表达。采用SPSS17.0统计学软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示。。结果与C组相比,A组1、3、7dAMPK与P-AMPK表达量差异无统计学意义(P>0.05);S组1、3、7d AMPK表达量上调(P<0.05);S组1、3d P-AMPK表达量上调(P<0.05),7d表达量差异无统计学意义(P>0.05)。与NPOCD组相比POCD组AMPK的表达量上调(P<0.05)。结论脾切除术后老年大鼠海马组织中AMPK和P-AMPK的表达上调。AMPK和P-AMPK表达量增加与POCD发生有关。
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