蛹虫草中CRISPR-Cas9编辑技术的建立

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虫草菌是我国的传统医药用真菌,早在2000年前《神农本草经》中就有对白僵蚕的记载,南北朝时期《雷公炮炙论》中记载了蝉花的加工方法,公元十五世纪西藏著作《医学千万舍利》记载了冬虫夏草的使用,宋代《图经本草》和明朝《本草纲目》中也有对虫草的记录(Lee et al., 2010)。蛹虫草具有多种药用功效,包括:抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗炎症、杀虫、抗微生物、降血脂血糖、抗衰老、神经保护、肾保护等功能。其主要活性成分包括四类:核苷酸、多糖、多肽和糖蛋白、甾醇和萜烯。其中多糖与抗炎症、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、脂类代谢等作用有关,虫草素有利于抗肿瘤、杀虫和抗微生物活性,甾醇则具有抗肿瘤和免疫调节活性(Zheng et al., 2011)。CRISPR是一种新型的基因编辑技术,被比喻为精确的分子手术刀,对人类致病基因的挖掘,疾病的靶向治疗,农业作物的品种改良,定向育种都具有巨大的潜力与前景。本实验利用农杆菌介导的遗传转化,利用CRISPR/Cas9技术对蛹虫草的URA5基因进行了编辑,并进一步通过RNA水平和蛋白水平的验证,该体系成功的对URA5进行了编辑,为蛹虫草菌种优化与改造奠定了基础(Qin et al., 2017; Chen et al., 2017)。
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