论文部分内容阅读
香蕉炭疽病是香蕉重要的采后病害,由香蕉炭疽菌[Colletotrichum musae（Brek.et Curt.）Arx]侵染引起,在全世界产蕉区普遍发生造成严重经济损失。目前对该病的防治仍以化学杀菌剂为主。然而,长期大量使用化学药剂,不仅会毒害有益微生物,污染环境,还会导致病原菌产生抗药性,并造成农药残留。因此,在香蕉采后防腐保鲜过程中相对安全的生物防治技术成为了研究重点。由于大部分拮抗微生物是从自然环境中分离得到的,与化学药剂相比,其货架期短,抗菌活性低,效果不稳定,因此需要对其进行进一步改良,以提高其潜在的生防能力。本研究从土壤中分离得到2株野生优良香蕉炭疽病生防菌株Bb5911和Bs6602,经鉴定分别为短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevi）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。以这2菌株作为出发菌株,通过紫外线和亚硝酸钠对其进行复合诱变处理,结果表明,在距离50cm的20W紫外灯下照射15s,2株菌株的致死率都在90%左右;以300mmol/L的NaNO2诱变处理60min,2株菌株的致死率都在90%左右。经复合诱变得到的突变株,采用牛津杯法,测定其对香蕉炭疽菌的抑菌活性,最终筛选得到2株具有最强拮抗活性的正突变菌株。其中,突变株5B37-3的抗菌活性比出发菌株Bb5911提高了112.41%,突变株6B8-5的抗菌活性比出发菌株Bs6602提高了83.80%。将这2株突变菌株每隔7天传代一次,连续传代10次,发现2株菌株的抗菌活性无明显下降,说明其具有较好的遗传稳定性。采用平板计数法,测定了突变菌株5B37-3和6B8-5对咪鲜胺的耐受力。结果表明,使5B37-3和6B8-5菌株致死的咪鲜胺最低浓度为20μg/mL;与原始出发菌株相比,5B37-3和6B8-5菌株的耐药性提高了2倍,当咪鲜胺浓度为2.6μg/mL时,其对5B37-3和6B8-5菌株的生长无明显影响。抑菌谱测定结果表明,菌株5B37-3和6B8-5的发酵液对14种植物病原真菌均有较强的抑菌活性,二者对香蕉多主棒孢菌[Corynespora cassiicola（Berk.and Curt.）Wei]和香蕉长蠕孢菌[Helminthosporium torulosum（Syd.）Ashby]的抑制作用最强。其中,对香蕉多主棒孢菌的抑菌圈直径分别为53.57mm和66.39mm;对香蕉长蠕孢的抑菌圈直径分别为52.82mm和53.69mm。