【摘 要】
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柱前衍生高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FD)是糖分析的重要方法之一。不同于常规的还原胺化反应,本研究采用新型荧光衍生试剂(4-胺氧基亚甲基-6-氯-7-羟基-香豆素),通过聚糖还原端
【机 构】
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武汉理工大学化学化工与生命科学学院化学系湖北省武汉市武汉理工大学南湖校区;
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柱前衍生高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FD)是糖分析的重要方法之一。不同于常规的还原胺化反应,本研究采用新型荧光衍生试剂(4-胺氧基亚甲基-6-氯-7-羟基-香豆素),通过聚糖还原端与胺氧基的缩合反应(肟化反应)对麦芽七糖进行了成功的标记。采用ODS反相柱,HPLC-FD监控(λex=330 nm,λem=470nm)七糖与胺氧基香豆素反应体系,观察到三个荧光衍生产物峰在10分钟内(等度洗脱,乙腈:水=15:85,v/v%)达到很好的分离。由电喷雾质谱分析,这三种衍生产物互为异构体,分别是肟式产物和五元吡喃环与六元呋喃环结构产物。产物峰峰面积在优化后的衍生条件下(反应时间3.5 h,反应温度75℃,乙酸/乙酸钠缓冲液(pH=3.0,0.2 M),香豆素与七糖的摩尔比为50/1,苯胺与七糖的摩尔比为100/1)达到最大。该研究通过采用新型荧光衍生试剂与肟化反应,为糖的定量检测奠定了良好的基础。
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