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短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BA06菌株不仅能够产生具有皮革脱毛功能的碱性蛋白酶(DHAP),而且还可以产生多种胞外蛋白酶。基因组的分析也证实编码这些蛋白酶基因的存在,同时也存在可能的调控基因。因此,我们分析研究了BA06菌株外泌蛋白酶及其调控蛋白基因在盐胁迫下的转录响应。随着培养基中NaCl浓度的提高(最高0.8 M),虽然细胞在基本培养液中生长差异不大,但胞外蛋白酶的总活性显著降低,并且延后。在此基础上,利用绝对定量PCR技术分析了5个可能的外泌蛋白酶基因和4个可能的调控基因在0.8 MNaCl胁迫下,连续3天的转录情况。结果表明:DHAP蛋白酶的在盐胁迫下转录拷贝数与对照相比在检测的3天中均出现明显的下降,特别是在48 h显著降低1个数量级;在其它几个编码外泌蛋白酶基因中,编码WPR基因的转录拷贝数任整体上略低于DHAP,但也在盐胁迫下转录水平降低;另外两个蛋白酶基因(epr、vpr)的转录拷贝数比DHAP基因低1～2个数量级,在盐胁迫处理后其转录水平变化不大;编码Vpr胞外蛋白酶基因似乎也不受盐胁迫的影响,在非盐胁迫的条件下转录水平略低于DHAP一个数量级。这些结果显示,DHAP确实是BA06菌株编码表达的一个主要胞外蛋白酶,进一步在转录水平上验证了我们前期的实验观察结果。对于分析的4个转录调控基因中,可能的负调控基因hpr的转录水平在盐胁迫条件下变化不大,而且总的转录拷贝数在整个研究的时间内比DHAP低1～2个数量级:盐胁迫导致sinR基因的转录略有下降;双组分系统degU/S基因在盐胁迫下,其转录的拷贝数也出现明显降低,但降低的程度小于1个数量级;并且degS基因的转录拷贝数略低于degU。因此,我们推测在短小芽孢杆菌中,盐胁迫可能通过降低degU的表达,从而抑制胞外蛋白酶DHAP的转录表达。