为进一步丰富烟草青枯病的生防资源,该研究对安徽省黄山及宣城烟区的健康烟株根际土壤进行烟草根际细菌的分离纯化,共得到烟草根际细菌178株。利用抑菌圈法,筛选出两株抗青枯病菌的根际细菌GZYCT-4和GZYCT-9,培养48 h的抑菌圈直径分别为16.64 mm和18.90 mm,上述2株拮抗根际细菌均能有效地防控烟草青枯病,降低发病程度。系统发育分析结果表明GZYCT-4和GZYCT-9均属于芽孢杆菌。采用PCR扩增技术初步明确菌株GZYCT-4和GZYCT-9均具有合成脂肽类物质的能力,且其脂肽类粗提物对烟草青枯病菌的抑菌圈直径分别达到16.24mm和20.71mm。通过趋化性试验探究烟草根系分泌物及有机酸对拮抗菌GZYCT-4和GZYCT-9在烟草根部定殖的影响,结果显示GZYCT-4对’红花大金元’根系分泌物有较强的趋化反应,且’红花大金元’根系分泌物产生的草酸对GZYCT-4吸引作用较大,而GZYCT-9则对K326根系分泌物有较好的趋化反应,K326根系分泌物产生的柠檬酸对GZYCT-9有较好的吸引作用。本研究结果为进一步开发利用优良的生防菌株提供理论依据。