不同氧浓度对细胞存活和抗氧化能力的影响

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目的:低氧是一种典型的应激环境,一方面,机体遭受严重低氧会导致脑中风等一系列疾病的发生,而另一方面,适度低氧能使机体对低氧环境产生适应性反应,在一定程度上促进机体存活。研究不同氧浓度下细胞代谢水平的改变,有助于人们更深入地了解机体对低氧的适应性调节机制。方法:将PC12细胞分别置于适度低氧(10%O2)和严重低氧(0.3%O2)条件下,处理24h后用MTT法检测不同氧浓度对PC12细胞存活的影响;采用总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒检测PC12细胞内总抗氧化能力的改变;用Western blot方法检测HIF-1和BNIP3蛋白的表达水平。结果:(1)MTT检测结果表明,适度低氧(10%O2)24h后,PC12细胞的数目较对照组显著升高(P<0.001),而严重低氧(0.3%O2)24h后,PC12细胞的数目显著降低(P<0.001);(2)T-AOC检测结果显示,适度低氧后总抗氧化能力较对照组有上升的趋势,严重低氧处理后,细胞内总抗氧化能力明显降低(P<0.05);(3)与常氧组相比,无论适度低氧还是严重低氧都能增加HIF-1的蛋白表达,并且适度低氧较严重低氧细胞的HIF-1表达水平更高,此外,相对常氧,两种低氧条件都能增加BNIP3的蛋白表达,但严重低氧较适度低氧BNIP3表达水平更高。结论:严重低氧导致细胞维持氧化还原稳态和细胞存活能力降低,而适度低氧则能增强细胞维持氧化还原平衡和细胞增殖的能力,我们推测HIF-1及其靶基因BNIP3可能参与调节细胞的抗氧化能力,进而影响了不同氧浓度下细胞的存活状态。
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