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目的:研究吡唑啉酮水杨酰肼席夫碱类化合物(Lgf- YL-9)在体内、外对KB及其耐药株KBv200细胞的抑制作用,并探讨此类化合物的抗肿瘤机制。方法:体外细胞毒测定:MTT法,裸鼠体内抑瘤实验分别测定Lgf-YL-9对KB 和KBy200细胞的抑瘤率;Hoechst33258染色后荧光显微镜观察凋亡细胞形态;细胞内活性氧及线粒体膜电位分别以 DCFH-DA和DiOC6荧光标记, 流式细胞仪检测;DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞梯形条带;Western Blot检测凋亡通路蛋白的表达。结果:Lgf-YL-9对KB和 KBv200细胞的IC50分别为3．81±0．02和3．45±0．03 μ mol／ L,两者差异无显著性(P>0．05)．体内实验结果显示Lgf- YL-9在1．5mg／kg、3mg／kg、6mg／kg三个浓度下对KB 及KBy200细胞的抑瘤率(％)分别为20．3、34．7、43．1及 -1．6、4．7、20．9,Lgf-YL-9最大浓度治疗组KB细胞移植瘤的瘤重与对照组相比有显著性降低(P<0．05), KBv200细胞移植瘤的瘤重治疗组与对照组之间差异无显著性(P>0．05)。Hoechst33258染色荧光显微镜(×400)下可见Lgf-YL-9导致的凋亡细胞形态变小、核固缩或断裂成大小不一的圆形颗粒,胞核呈致密的亮蓝色荧光团块,而活细胞核呈弥散均匀的淡蓝色荧光。Lgf-YL-9以3、6、12 μg／ml作用24h后,流式细胞仪测定KBv200细胞线粒体膜电位呈浓度依赖性下降(P<0．05);KB细胞线粒体膜电位最大浓度组下降与对照组之间差异有显著性(P<0．05)。 Lgf-YL-9以3、6、12 μg／ml作用24h后,流式细胞仪测定KB细胞内活性氧呈下降趋势, 3、12μg／ml浓度组与对照组之间差异有显著性(P<0．05);KBy200细胞内活性氧6、12μg／ml浓度组下降与对照组之间差异有显著性(P <0．05)。此外,Lgf-YL-9可浓度依赖性的诱导两种细胞凋亡,形成DNA Ladder．Western Blot结果显示Lgf-YL- 9可引起两种细胞胞浆细胞色素C呈浓度依赖性升高,并导致Caspase-3,7,9、Parp的激活,从而诱导肿瘤细胞凋亡。结论:Lgf-YL-9对KB和KBv200细胞具有一定的抗肿瘤活性,其机制可能是通过细胞线粒体凋亡途径完成的。