人胚源性间充质干细胞分化为毛囊过程中细胞迁移问题的研究

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研究人胚源性间充质干细胞(human embryo mesenchymal stem cell,hMSC)在分化为裸鼠毛囊过程中的细胞迁移,分析hMSC在裸鼠毛囊中的归巢与裸鼠毛发再生之间的关系,为干细胞使得衰老或病变器官再生提供实验依据和理论依据。方法所用的hMSC由本实验室保存。将此细胞进行荧光染料标记。将标记后细胞以注射的方式移植到裸鼠背部皮肤,移植定位在表皮和真皮之间,移植的细胞数量为10~4。同时设以阴性对照。注射后不同时间点(1、3、5、7、30 d)取材。一部分材料进行冰冻切片,荧光显微镜观察hMSC迁移情况。另一部分样品进行常规固定脱水、石蜡包埋、连续切片。HE染色法比较相关组织的细微结构差别。用免疫组织化学法鉴定HLA-1和keratin的表达情况。结果发现大体观察结果显示实验鼠注射部位约0.5 cm~2面积,毛发明显增多。HE染色发现在移植后1 d,裸鼠注射处皮肤组织切片显示皮下有大量细胞团出现;3 d可见初期的毛囊,5 d和7 d可见生长中的毛囊,30 d可见形态典型的毛囊。荧光观察结果显示,hMSC多集中分布在毛乳头部位和毛囊外根鞘处。随移植时间延长,hMSC由毛囊内部向外部迁移。免疫组化实验显示:在毛囊的毛乳头部位和外根鞘部位均可见到HLA-1阳性。部分切片可观察到HLA-1和keratin的双阳性。这表明hMSC可诱导裸鼠毛囊再生并可分化为毛囊上皮细胞和毛乳头细胞,该细胞多在毛乳头和毛囊外根鞘处归巢。hMSC的这一特性有望为毛发再生和干细胞治疗衰老器官的研究再生提供新的希望和途径。
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