豚鼠左心室肌细胞IKr通道电流的昼夜节律性

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目的 24h昼夜周期内,许多基因的表达表现出明显的昼夜节律性。众所周知,多项心脏生理功能及病理特点都有比较明显的昼夜差别,包括心电图QT间期和许多室性心律失常的发生率。在此试验中,我们检验了心室肌中重要的复极电流通道—IKr通道基因表达及功能的昼夜节律性。方法健康豚鼠(300g—400g)在人工昼夜光照条件(24h内12h光照,12h黑暗,上午七点开灯,晚上七点关灯)下饲养至少二周。昼夜节律预适应结束后,从开灯时间起,每隔六小时取左心室肌标本,以荧光定量PCR法测定IKr通道基因(hERG基因)mRNA表达水平并比较。取分别代表豚鼠活跃期及静止期的两个时间点,上午十点及夜间十点,分别分离豚鼠左心室肌细胞,以全细胞膜片钳测定IKr通道电流大小并比较。结果豚鼠心室肌hERG基因的mRNA表达量有明显的昼夜节律差别,在日间达到高峰,夜间表达量明显下降,日间及夜间表达量相差4.7倍。全细胞膜片钳测定的豚鼠活跃期及静止期的IKr电流也有明显差别,上午十点平均电流密度1.14±0.13,夜间十点平均电流密度0.82±0.07,P<0.05,有明显统计学差异。结论豚鼠心室肌细胞IKr通道基因表达及其通道电流有明显的昼夜节律波动。
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