糖苷合成酶的设计改造与催化体系的优化

来源 :第十一届中国酶工程学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qpalzm951
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本文以103S EGCaseⅠ晶体结构为基础,通过103S EGCaseI与EGCase Ⅱ晶体结构的对比,找到EGCaseⅡ关键的催化区域,通过理性设计的方式获得活力提高的突变体,从而提高了EGCaseⅡ的催化活性。同时以此活性提高的突变体为出发点,建立了以α-D-氟化糖、D-sphingosine为底物的合成体系,同时建立了基于荧光的HPLC产物分析方法,对合成体系中的温度、pH、酶浓度、反应时间等因素进行优化,从而使其转化率达到95%。
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