炎症激活的星形胶质细胞对iPSCs增殖的作用

被引量 : 0次 | 上传用户:didos_jo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的通过原代培养获取大鼠星形胶质细胞,对星形胶质细胞进行体外炎症造模并重编程为诱导多能干细胞;将激活的星形胶质细胞与重编程获得的诱导多能干细胞进行体外共培养;验证激活的星形胶质细胞对诱导多能干细胞增殖的作用并研究其作用机制,为创伤性脑损伤后神经修复的双细胞移植治疗提供实验基础。方法利用慢病毒感染的方法将转录因子Sox2、Oct4、c-Myc和KLF4导入大鼠星形胶质细胞中,并对诱导产生的细胞进行鉴定以确定其为诱导多能干细胞;使用脂多糖LPS体外刺激星形胶质细胞产生炎症反应并对反应水平进行检测;Transwell小室法将炎症造模的星形胶质细胞与诱导多能干细胞共培养后,采用CCK-8、流式细胞周期分析的方法检测iPSCs的增殖情况;同时,共培养样本使用Illumina Hiseq 2500进行转录组测序,对测序结果分析后行PCR验证,并使用Wstern blot、免疫荧光等方法进行分子机制的研究。结果 (1)转录因子Sox2、Oct4、c-Myc及KLF4将大鼠星形胶质细胞重编程为诱导多能干细胞(iPSCs)。(2)iPSCs形态上胚胎干细胞(ESCs)相似,其内源性多潜能基因表达量高,且具有形成畸胎瘤和定向分化为神经元的能力。(3)脂多糖LPS刺激的星形胶质细胞炎症因子表达量较正常星形胶质细胞明显增高;(4)炎症激活的星形胶质细胞显著刺激了iPSCs增殖;(5)转录组测序发现共培养后各组的iPSCs之间存在较多差异基因,并且对于星形胶质细胞的转录组测序同样发现较多的差异基因;(6)Western blot结果发现炎症刺激的星形胶质细胞可以释放更多的IGF-1,并且在iPSCs中PBK蛋白表达量及PI3K-AKT信号通路活化明显增强;(7)免疫荧光发现iPSCs细胞膜表面存在IGF-1受体,是IGF-1产生作用的基础。结论本实验研究证实了大鼠星形胶质细胞能够重编程为诱导多能干细胞;而炎症激活的星形胶质细胞可以释放大量的IGF-1等生长因子,在共培养时这些生长因子与iPSCs表面的IGF-1受体结合并转录调控细胞内PBK基因的表达,从而造成PI3K-AKT信号通路活化增强,产生细胞增殖效应。炎症激活的星形胶质细胞与iPSCs共移植成为创伤性脑损伤后的神经修复提供了新思路。
其他文献
目的:我国现阶段人口结构老龄化趋势日渐加重,骨质疏松和良、恶性肿瘤所致椎体压缩性骨折在临床上发病率逐年增加,对压缩椎体良恶性或者骨折类型的鉴别,决定了临床治疗方案的
“满铁”在九一八事变后加紧侵略华北,是日本侵华的急先锋,不仅为侵略者提供物资支持,还积极“接收”并经营重要的煤矿产业,巩固日本政府占领的“成果”,充当日本侵略者殖民
为研究多环芳烃(菲)添加对珠江口河流湿地土壤氮矿化的影响,选取珠江三角洲番禺区的农村河流和城市河流湿地,采用鲜土对两种湿地土壤添加3种浓度的菲(0、15、100 mg·kg-
目的 探讨鼻窦真菌球的CT和MRI表现及诊断价值。方法 回顾性分析经手术、组织病理学证实的 68例鼻窦真菌球的影像学资料。结果 发病部位 :单个鼻窦发病 60例 (88.2 % ) ,
<正> 例1 王某。女,20岁,1974年10月11日入院,住院号1030。患者1973年曾因精神错乱,经某精神病院治疗好转出院。于1974年10月8日夜间受惊后,出现寒热往来,泄泻恶臭黑便,日行
互联网给用户带来了庞大的信息量,但是这样使得用户对信息的使用效率大打折扣。面对海量的网络内容资源,例如视频,新闻等等,用户往往无法快速获取到对自己有用的内容。推荐系
作为当前新兴的教育形式,开放教育在扩大受教育群体、培养新时代人才、体现社会教育公平等多个方面都起到了重要作用。MOODLE平台作为如今网络教学的主要平台,在现代化教学模
目的探讨不同年龄、性别人群血管紧张素原(AGT)基因T704C多态性与动脉硬化性脑梗死(ACI)的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)进行AGT基因T704C基因型检测,用全自动生化分析仪
近年来,我国专利申请量持续增长,但是建筑领域申请质量一直偏低,本文从高质量专利申请应具备的特点出发,阐述了如何进行高质量专利申请的撰写,为提升建筑领域专利申请质量提
期刊
中药治疗痰湿中阻型眩晕一例王树红患者,女,58岁。于1995年10月16日以"眩晕"重症急收入中医病房。患者精神萎糜,懒言,嗜卧,意识清楚,双目徽闭,自述几日来眩晕欲顷,不能站立,双目视物旋转,头重如裹,恶
期刊