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目的:探讨1型多聚ADP核糖合成酶(poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)对炎性刺激物脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人外周血单个核细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的调节作用及其机制。方法1.对培养的正常人外周血单个核细胞分别给予LPS刺激6h,18h,24h,48h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中HSP70的表达水平,PARP-1抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3AB)预处理细胞后,观察3AB对LPS诱导的HSP70表达的影响。2.提取培养细胞全蛋白,采用PARP活性检测试剂盒(universal colorimetric PARP assay kit,Trevigen)测定培养细胞内PARP酶活性的变化。3.提取培养细胞核蛋白,采用凝胶迁移实验(Electrophoretic Mobility ShiftAssay,EMSA)检测核内转录因子热休克因子(heat shock factor,HSF)的DNA结合能力,并观察PARP-1抑制剂对HSF的DNA结合能力的影响。结果与空白对照组相比,LPS刺激人外周血单个核细胞表达HSP70在不同时间点均显著增高,在6h,18h,24h,48h的表达水平(OD值)分别为115.44+1.92(P<0.05),195.96+5.33(P<0.05),233.83+15.90(P<0.05),239.43+3.07(P<0.05)。与单纯LPS刺激组相比,PARP抑制剂3AB预处理细胞后HSP70的表达从18h开始逐渐降低,在24h和48h均显著低于LPS刺激组,其在6h,18h,24h,48h的表达水平(OD值)分别为141.94+4.41(P>0.05),175.12+16.29(P>0.05),163.54+5.28(P<0.05),153.26+7.22(P<0.05)。同时在24h和48h检测PARP酶活性,3AB显著抑制了LPS刺激所致的PARP酶活性的增高。EMSA结果显示,LPS刺激细胞24h和48h后,HSF的DNA结合能力显著增高;给予3AB预处理细胞后HSF的DNA结合能力明显低于单纯LPS刺激组。结论在LPS诱导人外周血单个核细胞产生HSP70的过程中,PARP-1活性明显增高。激活的PARP-1通过调节HSF的DNA结合能力调控了HSP70的表达。