【摘 要】
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目的:基于亲和素-生物素系统连接Fe3O4与DNA适配体构造的一种新型纳米传感器,用于变异链球菌的检测方法研究。方法:将生物素修饰的DNA适配体与链霉亲和素修饰的Fe3O4连接,借
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院牙体牙髓科; 国家口腔疾病临床医学研究中心; 上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所; 上海工程技术大学材料工程学院;
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2017YFC0840100,2017YFC0840110);国家自然科学基金项目(81870749);上海交通大学医学院科技处技术转移推广项目(ZT201810)~~
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目的:基于亲和素-生物素系统连接Fe3O4与DNA适配体构造的一种新型纳米传感器,用于变异链球菌的检测方法研究。方法:将生物素修饰的DNA适配体与链霉亲和素修饰的Fe3O4连接,借助亲和素-生物素系统强大的非共价结合力,加强了DNA适配体的分子自组装作用。同时DNA适配体可与变异链球菌特异性识别并结合,覆盖Fe3O4表面的过氧化物酶活性位点,使氧化反应速率下降,生成的蓝色产物减少,最后用酶标仪检测反应液的光密度值（Optical density,OD值）。结果:反应体系的OD值与变链菌的浓度呈负相关,随着菌液的浓度增加,OD值可从1.563下降至0.192,信噪比可达7.4倍,核酸适配体可较好地识别并区别其它菌,相比于分子生物学及免疫学方法有着更佳的灵敏度,同时具有省时、简便、快捷的优势。结论:本实验通过亲和素-生物素系统强化了Fe3O4与DNA适配体的分子自组装连接,在检测变异链球菌实验中性能优良,也为快速检测细菌提供了新的研究思路。
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