云南省烟草靶斑病菌菌丝融合群及ITS序列分析

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2015—2016年辽宁省、云南省、黑龙江省烟区均发生烟草靶斑病,其中我国云南省临沧市和普洱市烟草种植区为首次大面积发生,暴发面积高达6万亩,该病害主要为害叶片形成病斑,病斑坏死部分易碎形成穿孔,病斑易连片,造成经济损失严重。鉴此,本文针对云南烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani K(u|¨)hn)的菌丝融合群和ITS序列进行了系统鉴定,研究结果如下:1.采集云南省的烟草靶斑病病叶标本30余份,采用常规组织分离法获得36个立枯丝核菌Rhizoctonia solani菌株。将所获菌株分别与立枯丝核菌标准融合群菌株AG-1-IA、AG-2-1、AG-3、AG-4-HGI、AG-4-HGⅡ、AG-5、AG-6-HGI、AG-6GV、AG-8、AG-9进行载玻片对峙培养,并进行菌丝融合观察,结果表明:36个菌株均属于立枯丝核菌AG-3标准融合群,不与其他标准融合群发生融合反应,这表明我国云南省引起烟草靶斑病的病原菌Rhizoctonia solani均是AG-3融合群,是国内首次在云南省的罹病烟草植株上分离得到。2.随机选取云南省9个地区各1个代表性菌株,提取菌丝基因组DNA。利用5.8S rDNA-ITS区序列分析方法,采用MEGA6.0软件对该地区烟草靶斑病菌不同地区代表菌株的系统演化关系进行了研究。结果表明:Rhizoctonia solani菌株的ITS序列可明显的分成3个分支,同一菌株的不同ITS序列可分别存在于不同的分枝中,但均隶属于AG-3融合群,且隶属相同融合群的不同菌株之间其序列的一致性可高达97%~99%。
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