外源性RGS16基因稳定转染对C6胶质瘤细胞生长的影响

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目的研究RGSl6基因转染对大鼠胶质瘤细胞C6细胞生长的影响。方法构建真核表达载体plRES2-EGFP-RGSl6,通过脂质体法转染C6细胞,经G418筛选后荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,RT-PCR证实RGSl6的mRNA表达,免疫细胞化学方法检测细胞中RGSl6蛋白表达。最后应用流式细胞仪、生长曲线、平板克隆形成等方法研究RGSl6基因对胶质瘤细胞周期、生长及增殖等特性的影响。结果分别成功构建了稳定表达RGSl6和表达空载体的细胞系C6-RGSl6、C6-GFP。经流式细胞仪检测知C6-RGSl6处于S期的细胞比例明显高于C6-GFP及C6;经细胞计数绘制生长曲线知C6-RGSl6生长的速度快于C6-GFP及C6;但平板克隆实验显示C6-RGSl6较C6-空及C6的克隆形成率低。结论RGSl6促进C6细胞周期从Gl期向S期过渡加快细胞生长速度,但是并不促进细胞克隆形成。
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