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牛筋条(Dichotomanthes tristaniaecarpa)在植物分类上属于蔷薇科牛筋条属,是中国西南云南和四川特有单种属,仅分布于中国.20世纪80年代,云南省农业科学院园艺作物研究所结合云南山高坡陡、冬春干旱的实际,总结群众经验,研究发现,牛筋条无论嫁接苹果和梨都有矮化树体和提早结果的效果,可以一砧多用,是一个很有希望的矮化砧.但用其嫁接培育的苹果或梨苗,主根发达,入土很深,须根少,不易移栽成活;成活的也表现出缓苗期长,生长缓慢,影响了推广应用.目前云南牛筋条主要是种籽繁殖和扦插繁殖,但种籽繁殖的实生苗因主根发达,入土深,须根少,又是常绿树,所以移栽成活率低;扦插生根困难,育苗成本高,效率低.因此,寻找牛筋条芽增殖的高效方法,可为大批量育苗,降低成本,提高效率,促进牛筋条的推广应用奠定基础.在2015年3-5月的晴好天气,剪取云南特有果树及砧木资源圃中种植的牛筋条当年生营养枝的幼嫩茎段或茎尖,迅速带回实验室,去掉叶片备用.(1)外植体的灭菌:剪去嫩茎上的叶片,用洗洁精清洗茎段或茎尖,再用自来水冲洗干净,将茎段或茎尖放入超净工作台中,用75%的乙醇浸泡30 s,再用灭菌蒸馏水将乙醇冲洗干净,再放入0.1%的升汞溶液中浸泡25 min,无菌水清洗4次;(2)无菌系建立:基本培养基是MS培养基,添加6-BA和NAA,将培养基装入广口瓶中,每瓶装入培养基35 mL,密封后进行高温高压灭菌,冷却待用;在超净工作台中,将消毒好的茎段或茎尖剪成长为2 cm的茎段,然后将剪好的茎段插入灭菌后的MS培养基中,每瓶培养基插入茎段6个,密封后将其放入培养室进行培养;培养室温度控制在26 ℃,每天光照12 h,光照强度为1100 1x;避免外界对培养室的污染,及时清除被污染的茎段和培养基.(3)继代增殖:牛筋条在经过一段时间的培养后,在无菌系建立的基础上,进行牛筋条芽增殖培养基的筛选工作,所用培养基为MS+1~2 mg·L-1 6-BA+0.05%~0.5%NAA,添加6-BA 1~2 mg·L-1(细胞分裂素)、KT 1~2 mg·L-1(激动素)、NAA0.1~1mg·L-1(生长素)等,设计了2组12个配方来进行牛筋条芽增殖培养基的筛选.每瓶培养基为50 mL,接入无菌系的茎段3个,密封后放入培养室进行继代培养,每周对培养室消毒1次,每20~25 d更换1次培养基,通过一个周期(60 d)的继代培养,牛筋条增殖系数达到13~15.通过多次的筛选比较,基本筛选出MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1配方对牛筋条芽增殖有较好地效果,解决了在扩繁过程中芽的增殖问题,其芽的增殖数量在5~10棵之间.