感染PRRSV猪肺泡巨噬细胞系表达炎性细胞因子

来源 :第22届国际猪兽医协会大会(IPVS2012) | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzq1989aa
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  目的:对感染1型或2型PRRSV病毒株的永久的PAM细胞进行炎症细胞因子表达改变的研究,以使用PRRSV分离株开发体外系统研究免疫功能。方法:对PAM-pCD163接种PRRSV,通过观察CPE和免疫荧光实验确定病毒感染。感染后不同时间点(6,12,24,48小时)提取总RNA。使用DNase Ⅰ处理RNA,紫外分光光度计定量。使用oligo-dT引物对1mg的总RNA进行反转录,根据猪宿主免疫应答相关细胞基因序列设计引物,进行荧光定量PCR分析。结果:在2型PRRSV感染PAM细胞后24和48小时,IL-1α和IL-1β会被转录激活。另外,在PAM细胞中,2型PRRSV比1型PRRSV可以诱导更高水平的IL-6,IL-7和IL-8m RNA。1型PRRSV感染过的PAM细胞中L-1α表达稍微上调,IL-1β和IFN-γ不变或下调。1型PRRSV感染过的PAM细胞中MCP-2表达量很大,2型PRRSV感染过的PAM细胞中AMCF-1上调幅度最大。1型和2型PRRSV感染过的PAM细胞中TLR-3、4和7 mRNA表达显著下调或不变。结论:设计的基于PAM细胞的病毒感染方法,可以用来研究PRRSV发病机理和免疫情况,并可用来筛选有毒或无毒病毒株。
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