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背景:Toll样受体(TLRs)是Ⅰ型跨膜受体家族,最早在果蝇中被发现。Toll样受体4(TLR4)是在哺乳动物中被发现的第一种TLRs,它通过识别微生物的病原相关分子模式(PAMPs),从而引起宿主细胞的免疫反应。脂多糖(LPS)作为TLR4的配体,可通过TLR4激活相关信号通路,如髓样分化因子88(MyD88)依赖途径和NF-κB信号通路,进而引起一系列炎症反应。脾脏作为哺乳动物的免疫器官,含有大量的淋巴细胞,在细胞免疫和体液免疫中发挥重要作用。目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在细菌脂多糖(LPS)诱导的炎症反应中对小鼠脾脏T淋巴细胞的影响。方法:C57 BL小鼠野生型和TLR4基因敲除型各2只,6-8周周龄,每种小鼠分为实验组和对照组。实验组小鼠按5mg/kg体重腹腔注射LPS;对照组按5ul/g体重腹腔注射PBS。小鼠禁食不禁水,24h后颈椎脱臼处死分离脾细胞。提取脾细胞总RNA,并逆转录为cDNA(1)Real-time PCR检测TLR4 mRNA表达情况,确定TLR4基因是否完全敲除。(2)Real-time PCR分别检测脾脏中Tregs、Th1、Th2、Th17细胞转录因子FoxP3、T-bet、GATA3、RoRoγt mRNA水平。实验重复5次。结果:(1)与野生型小鼠相比,TLR4基因敲除型小鼠脾细胞中未检测到TLR4基因表达。(2)野生型与TLR4基因敲除型小鼠在注射LPS后,FoxP3、GATA3、RoRγt的mRNA表达水平与各自的空白对照组相比均下降(P<0.05);空白对照组中TLR4基因敲除型与野生型小鼠相比,TLR4基因敲除型小鼠FoxP3、GATA3、RoRγt mRNA表达水平均升高(P<0.05);T-bet mRNA表达水平在各组中的变化无统计学意义。结论:TLR4在生理状态下和炎症反应中对脾脏中的Tregs、Th2、Th17细胞生成具有抑制作用。