【摘 要】
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目的:考察新型抗体靶向性核酸转移系统的关键组份:葡萄球菌A蛋白-聚乙烯亚胺交联物(SPA-PEI交联物)的生物学功能,即结合IgG,压缩、复合DNA的能力。方法:采用酶联法和中和抑制
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目的:考察新型抗体靶向性核酸转移系统的关键组份:葡萄球菌A蛋白-聚乙烯亚胺交联物(SPA-PEI交联物)的生物学功能,即结合IgG,压缩、复合DNA的能力。方法:采用酶联法和中和抑制实验测定SPA-PEI交联物与多种来源IgG的结合能力;采用DNA凝胶阻滞实验测定SPA-PEI交联物与DNA片段的结合;采用溴化乙啶拒掺实验测定SPA-PEI交联物压缩DNA的能力。结果:SPA-PEI交联物可与多种种属来源的IgG(包括兔、人、小鼠等)良好结合,但有一些动物种属限制;SPA-PLL交联物与IgG结合具有SPA特异性,交联过程对SPA的结合特性无明显影响,保持了较好的SPA活性;SPA-PEI交联物能较好地中和质粒DNA或脱氧核酶(Dz Ti)的负电荷,形成电中性或带正电荷的SPA-PEI/核酸复合物,并具有压缩DNA的能力,其压缩DNA片段的能力接近游离PEI。结论:本项目组制备的葡萄球菌A蛋白-聚乙烯亚胺交联物(SPA-PEI交联物),保持了SPA和PEI的生物学活性,即SPA结合IgG的特性,PEI复合、压缩DNA片段的能力;SPA-PEI交联物可用于基于SPA-PEI交联物的抗体靶向性核酸转移系统的构建。
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