卡那霉素人工半抗原的制备及其基于IgY的间接竞争EILSA检测卡那霉素残留方法的建立

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本研究旨在通过建立基于特异性卵黄抗体(IgV)的检测食品中的卡那霉素的方法并通过各种指标评价其可行性。具体方法为利用碳二亚胺法偶联牛血清白蛋白(BSA)与卡那霉素并作为免疫原免疫下蛋鸡。使用PEG6000法提取IgV并检测效价,五免之后效价最高达到1:256,000。以卵清蛋白(OVA)偶联卡那霉素作为包被原使用棋盘法确定抗原与抗体的最优工作稀释倍数分别为2μg/mL,与1:2,5000。并用获得的IgY抗体建立间接竞争ELISA方法(ic-ELISA),所建立的方法的半抑制率为4.48ng/mL,回归曲线方程为y=-15.62x+60.17(R~2=0.98,n=3)。检测卡那霉素的ic-ELISA方法表现出较低的交叉反应率,并且经验证从牛奶、鸡肉及猪肉中的回收率分别在82.02%到98.20%之间,相对标准偏差为5.13%。本研究显示,特异性IgY成功应用在建立检测卡那霉素残留的ic-ELISA方法上并具有推广到检测其他抗生素残留检测的前景。
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