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人白细胞介素18（hIL-18）是一种重要的免疫调节因子,可以诱生IFN-γ、GM-CSF等多种细胞因子,促进NK细胞和T细胞的成熟与活化,增强NK细胞、T细胞的细胞毒活性,协同IL-12诱导Th1状态的出现,在机体抗肿瘤免疫中起到重要作用。IL-18为18.5kD的单链活性蛋白,没有N-糖基化位点,适于在大肠杆菌（E.coli）中表达;IL-18不形成链内二硫键,利于中下游的纯化、复性等工艺的选择。本室已经从人外周血单核细胞中克隆了成熟hIL-18 cDNA,并利用原核表达质粒pBV220构建了重组表达质粒pBV220-IL-18,转化大肠杆菌得到的基因工程菌pBV220-IL-18/DH5α,rhIL-18表达量约占全菌蛋白的25%（另文报导）。原核表达系统的表达效率较高,多种因素影响其表达效率,为了提高rhIL-18的表达效率,分别进行菌株筛选、改变诱导起始OD值、诱导温度、诱导时间等,实现rhIL-18的高效表达,克隆12（Cl12）在OD600=0.5时,40℃诱导3h表达量最高,可达全菌蛋白的35%。用低浓度尿素（2mol/L尿素,20mmol/L Tris-HCl pH8.0,10mmol/L β-ME）洗包涵体,高浓度尿素（8mol/L尿素,20mmol/LTris-HCl pH8.0,10mmol/L β-ME）溶解包涵体,得到纯度达85.3%的高纯度包涵体。实验对照了五种复性方案,筛选到一种理想的复性方案。在此基础上初步探讨了rhIL-18的纯化工艺,分子筛层析一步纯化即得到纯度达96%的rhIL-18。利用MTT染色法研究rhIL-18对NK细胞促杀伤作用和对外周血单个核细胞（PBMC）的促增殖作用,采用半定量RT-PCR方法研究rhIL-18诱导IFN-γ基因的表达情况,rhIL-18（50ng/ml）与亚适剂量的PHA（0.5μg/ml）可以明显地促进PBMC增殖,与亚适剂量的IL-2（10U）联合可以促进IFN-γ基因转录,增强NK细胞细胞毒活性。