猫须草对氧化应激损伤动物肠道屏障的保护作用

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本试验旨在研究猫须草的主要有效成分及其水醇提取物对氧化应激损伤的仔猪肠道上皮细胞及肠道紧密连接的保护作用。猫须草样品自然干燥后分叶与茎粉碎保藏。概略养分及总酚酸、黄酮物质含量分析采用经典方法。猫须草有效成分采用标准方法(50%乙醇浸提)提取,酚酸和黄酮化合物种类与含量采用HPIC-MS测定,提取物的体外抗氧化能力采用传统方法测定。试验采用蔡旋等建立的过氧化氢诱导的仔猪上皮细胞氧化损伤模型,检测不同剂量的猫须草提取物对仔猪肠道上皮细胞IPEC-J2的活力、胞内自由基及紧密连接蛋白表达的影响。结果表明:1)猫须草中叶与茎的总酚含量分别为(31.24±4.75)和(13.80±0.90)mg/g干物质,含量较高。2)猫须草叶、茎提取物均具有良好的铁离子还原能力、超氧阴离子自由基清除能力、羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力及总氧自由基清除能力,在所有体外抗氧化能力上,同浓度叶提取物抗氧化效果优于茎提取物(P<0.05)。3)猫须草中主要酚类物质有迷迭香酸、咖啡酸、半齿泽兰素、熊果酸、甜橙黄酮和TMF衍生物,但茎和叶中各酚酸及黄酮含量差异较大。4)猫须草茎、叶提取物对氧化应激损伤的肠道上皮细胞活力均有一定提高,叶提取物的细胞活力提高作用显著高于茎提取物(P<0.05),其机理可能与根和叶中酚酸、黄酮类物质组成不同有关。5)猫须草叶提取物增强仔猪肠道上皮细胞活力最佳作用浓度为100μg/mL,在24 h内,作用效果随时间增长而增加,超过24 h,随提取物作用时间增加,细胞活力无显著变化(P>0.05);猫须草茎提取物的最佳作用浓度为300μg/mL,最佳作用时间与茎的一致。6)猫须草提取物能有效清除胞内自由基,并提高紧密连接蛋白occludin、claudin-1及ZO-1的mRNA转录,提示可以增强仔猪上皮紧密连接。由此可见,猫须草有酚酸、黄酮类成分含量高,有较好的抗氧化能力,且具有良好的肠道屏障保护作用,是一种潜在的饲料添加剂资源。
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