元宝枫中主成分含量和活性研究

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目的元宝枫叶中含有多种生物活性成分,如黄酮、强心甙、绿原酸、甾体、鞣质、多糖等。我们的酶动力学实验研究表明元宝枫叶对脂肪酸合成酶(FAS)有强抑制作用,该酶是治疗癌症的新的潜在靶部位,抑制FAS有可能成为一条新的化疗途径。通过高效液相色谱(HPLC)分离分析,表明元宝枫叶含有游离的没食子酸和大量的水解没食子酸,从基础研究的角度,可探索元宝枫中的生物活性成分的抑癌作用机理;并且为开发中国广博的天然产物资源提供了新的思路。元宝枫中黄酮类化合物含量较高。研究元宝枫叶中主成分之一的黄酮类化合物是否与抑制FAS存在一定的相关性,可以促进元宝枫叶中黄酮的分离和利用。方法采用高效液相色谱法在Diamonsil C18色谱柱(5μm,4.6×250mm),流动相:甲醇-0.025mol/L磷酸水溶液(15:85);流速:1.0mL/min;检测波长:272nm;柱温:室温;分离测定了元宝枫叶中游离和水解没食子酸的含量。用HPLC测定元宝枫中游离和水解没食子酸的含量。称取3g元宝枫叶粉末(过40目筛)置于锥形瓶中,加入乙醇溶液,水浴提取,在室温放冷备用。在505nm下测定吸光度,并根据标准曲线测定总黄酮含量。于340nm波长下测定NADPH每分钟吸光度的变化作为酶活性指标——△Ai,只加入萃取溶剂的测活结果?A0做为对照。计算快结合抑制程度If:If=(1-△Ai/△A0)×100%,作为对FAS的抑制率。测定不同提取液量对FAS的抑制程度,使FAS酶活力被抑制50%时的提取物浓度(IC50)作为衡量快结合抑制能力的指标。比较元宝枫提取物抑制FAS活性的大小。结果游离没食子酸含量为0.045%;水解没食子酸含量为1.456%。黄酮提取率最高的工艺条件为:35℃温度下,乙醇浓度为70%,固液比为1:30,提取1小时,黄酮的提取率为8.43%。抑制FAS的最佳工艺条件为:55℃温度下,乙醇浓度为50%,固液比为1:30,提取2小时,IC50的值为0.011。结论游离没食子酸含量较少,水解没食子酸含量大。元宝枫叶提取物中黄酮类物质的含量与对FAS抑制效果之间不是正相关,表明只有一部分黄酮类成分对FAS有抑制作用。而元宝枫叶中含有大量的水解没食子酸,抑制FAS元宝枫活性成分可能与没食子酸和黄酮类成分的结合形式有关。
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